信息Dct

4.7(10)细菌在一天假设一代人时间20分钟。使用一种细菌的维度12点下午2点直径的长度,一个细菌的数量等于3.77(10 _17)立方米。因此,假设细菌的密度是一样的水,一个细菌细胞繁殖(1000)(3.77)(10 _17)(5)(1021)_ 188500000公斤在24小时内!当然,这个质量是不可能获得一天从一个细菌。不过,这意味着什么,在实际情况中,细菌不分裂无限制,但受其他环境因素的影响如拥挤和疲劳的食物供应。

2.3.2大肠菌群测试

大肠杆菌群微生物被定义为所有有氧和厌氧,Gramnegative nonspore-forming、杆状细菌发酵乳糖,在48小时内气体和酸形成在35°C。该集团属于属大肠,

气杆菌、克雷伯氏菌和Paracolobacterium大多居住在人类的肠道,虽然他们也可以发现在外面的环境。虽然肠道外还发现,这组生物作为一个指示器用于水域病原体的存在。治疗后表层水可以用来饮用的目的,因此从污水处理厂废水排放可接受浓度的这些生物是有限的,因此测试的必要性。

大肠菌群的检测可能是定性的或定量的。顾名思义,定性试验只是试图确定大肠杆菌群的存在与否。定量测试,另一方面,量化生物的存在。在所有的测试中,无论是定性还是定量,所有媒体,必须消毒餐具等。这是为了排除不必要的生物会影响分析结果。

定性的测试。三个步骤用于定性测试:假定,确认,并完成测试。这些测试依赖大肠菌群的财产在乳糖发酵产生气体。倒置的小瓶发酵管的底部。瓶,倒置,陷阱里面气体形成气泡表明积极的天然气生产。

准备一个串行稀释如10 - 1 -,0.1,和0.01毫升的部分样本。每一个部分都是接种五复制管为一组。例如,对于10毫升部分,每个5发酵管接种10毫升的部分样本。1毫升的一部分,每个5发酵管也接种1 ml的部分样本等等与其余的连续稀释。在这个例子中,因为四个系列稀释(10、1、0.1和0.01),四组五管,使共20发酵管。

在假定的测试中,部分样品接种到含有乳糖的培养基配方的试管数量(或十二烷基胰蛋白示汤,还含有乳糖)和其他成分增长所必需的。对管培养35岁±0.5°C。解放的气体在24至48±3小时表明积极的测试。生物大肠杆菌群以外还可以解放气体在这个发酵温度,所以积极的测试仅仅意味着可能存在大肠菌群。

进一步测试确认完成既定的测试结果;这就是所谓的确认测试。这背后的理论测试使用的财产大肠杆菌群发酵乳糖即使在绿色染料的存在。Noncoliform生物不能发酵乳糖存在的染料。生长介质称为亮绿乳糖胆汤。假定线圈从正测试接种到发酵管包含误事。在假定测试,管孵化35岁±0.5°C。解放的气体在24至48±3小时表明积极的确认测试。

大肠杆菌群生物不止来源于人的肠道也从外部环境。有些情况下,如污染的调查水的供应与原始的水源,粪便nonfecal的品种需要区别开来。这个和类似的情况下,程序修改通过提高孵化温度44.5±0.2°C。使用的汤是欧盟中仍含有乳糖。高孵化温度nonfecal形式无法代谢欧共体的媒介。积极的测试结果,预示着由发酵气体的进化不是在48±3小时,但在24±2小时。

通常,定性测试只进行确认测试。但是可能存在情况下,其中一个想看到有机体为了识别它。假定和确认测试是基于间接证据实际上只是在看到生物。如果需要的话,测试执行完成。

在完成测试,一个线圈从正确认测试发酵管是有在准备一个Endo或者MacConkey琼脂培养皿或板块。对菜培养35岁±0.5°C 24±2小时。在这段时期结束时,要检查菜的增长。典型菌落生长,表现出一个绿色的光泽;典型的殖民地是浅色的,没有绿色的光泽。典型的殖民地确认大肠菌群的存在而非典型菌落既不证实也不否认他们的存在。(从这个Endo琼脂法也可以作为替代的绿色胆汁汤方法。)

Endo板块的典型或非典型菌落接种到一个琼脂斜面试管和一个包含乳糖发酵管。如果没有气体的演变在孵化后24至48±3小时35岁±0.5°C,完整的测试是负的。如果气体从管道,琼脂斜面的增长涂抹成微观滑动和革兰氏染色剂技术。如果孢子或革兰氏阳性棒存在,完整的测试是负的。革兰氏阴性杆菌,如果存在,完整的测试是积极的。

定量测试。在某些情况下,实际枚举的生物礼物的数量可能是必要的。这种情况下,例如,对于限制排污许可证。一般来说,两种方法用于列举大肠杆菌群:膜滤器技术和复合管技术。

膜滤器技术包括真空下过滤体积的水通过膜过滤在毛孔开口0.45鱼类,将过滤器放置在培养皿中孵化,孵化后和计数的殖民地发达。0.45 -恩开放保留过滤器上的细菌。样品的体积密度过滤取决于预期的细菌。样卷,收益率板计数20到80殖民地的培养皿中被认为是最有效的。标准体积过滤饮用水分析是100毫升,如果预期的浓度很高,要求一个更小的样本(如20毫升),样品必须被稀释分散细菌均匀。的分散将确保一个好的传播简单计数板上的殖民地。

M-Endo介质用于大肠菌群和粪大肠杆菌群M-FC介质。培养基是由把一个吸水垫培养皿和吸量足够的M-Endo介质或M-FC垫。过滤后,膜被钳和直接放置在垫。然后孵化文化35岁±0.5°C的大肠菌群和44.5±0.2°C的粪大肠杆菌群。最后24±2小时的潜伏期,发达的殖民地数量统计和报告每100毫升的生物。

列举大肠杆菌群的另一个方法是通过使用复合管技术。这种方法在本质上是统计和报告的结果是最可能的数量(或然数)的生物。因此,这种方法的另一个名字是或然数技术。这种技术是既定的定性技术的延伸,确认,并完成测试。换句话说,或然数可以是一个假定的结果,证实,或然数完成。管释放气体的数量,从每一组计算五管。然后使用这些信息来计算最可能的生物样本中每100毫升。

2.3.3泊松分布

使用或然数方法,使用一个叫做泊松分布的概率分布。从任何一本好书概率,概率(也称为概率函数),遵循泊松分布的随机变量X y = X有一个值的数学期望。数学期望获得的平均值,如果随机变量X是极其很多次。随机变量是一个函数依赖的机会,其值是实数。一定概率附加到函数;这与一个普通的变量中,其发生的概率并不是一个问题,虽然它总是有一个相应的概率。

为了看透泊松分布,让我们得到方程(2.27)。假设进行实验采样微生物的人口获得n微生物组成的一个示例。(人口的总集合所有可能的测量在一个特定的问题。样本人口的一个子集,包含测量获得的一个实验。)让y相应的样本中细菌的数量。细菌的比例因此y / n。然而,这并不是真正的细菌在整个人口的比例。真正的比例是由极限limitn ^ Ny / n。在方程的形式,在极限情况下y被预期数量的细菌,X, N是微生物在人口的总数。(稍后将学到,X最终确定最可能的细菌的数量。) Because X/N is the true proportion, it represents the probability that a bacterium can be picked from the sample or from the population. A single picking or observation of a bacterium in the sample is also called a trial. In this context, note that the sample can be thought of as comprising of several observations (picking) or trial.

如果选择一个细菌的概率是X / N,然后不挑选一种细菌的概率是1 _ X / N。假设有y细菌在给定

样本。因为这些细菌是发生在同一时间,他们同时外表是一个十字路口。交叉概率的事件,获取这些y细菌的概率是(X / N) (X / N) (X / N)……(X / N) =(联合国)y。这些细菌的出现,然而,在同一时间发生的发生“不是细菌。”If the number of bacteria in the sample is y, the number of not bacteria is n - y which, from the intersection probability of events, has a probability of occurrence of (1 - X/N)(1 - X/N)...(1 - UN) = (1 - X/N)n-y. Now, the simultaneous appearances of the bacteria and the not bacteria also has intersection probability, and this is given by the product of the probabilities as (X/N )y(1 - X/N )n-y.

有几种方法可以得到y细菌样本。的数量方面给出的数量组合的微生物n y, (n)。我们不会推导的公式组合的数量在这里讨论这个概念以来大学代数。这个公式是

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