水质测试方法

测定水的细菌学的质量不是一个简单的分析。测试为一个特定的病原菌会导致错误的结论。分析对病原菌是很难执行的。一般来说,数据没有定量重现。作为一个例子,如果被发现沙门氏菌缺席水样本,这并不排除可能出现的志贺氏杆菌、弧菌、或致病的病毒。水的细菌学的质量是基于测试程序不致病的微生物(主要是大肠杆菌组)指标。

大肠杆菌的细菌,如大肠杆菌和粪链球菌(enterococci),居住在人的肠道。这些是排泄粪便的大量人类和其他温血动物。典型的浓度平均每克约50000000大肠杆菌群。未经处理的生活污水一般包含超过3000000每100毫升。大肠杆菌群致病性细菌和病毒引起肠道疾病来自同一来源(即粪便排放病变的人)。因此,受粪便污染的水体污染被认为是由大肠杆菌的存在潜在的危险。

标准饮用水指定提供的水是安全的测试方法没有透露超过平均每100毫升的大肠杆菌生物。病原菌的数量,如typhosa沙门氏菌,在国内废水通常小于1每毫升大肠菌和平均密度肠病毒已被测量为virus-tocoliform 1:100,000的比例。致病性细菌的死亡速率大于死亡率的大肠杆菌群以外的动物的肠道。因此,在接触治疗,减少病原体的数量相对于大肠杆菌群。水质标准的基础上每100毫升是统计不到一个大肠杆菌适合人类食用。也就是说,有一个高不摄入任何病原体。这是一个环境保护署(EPA)标准只适用于处理治疗包括氯化水。大肠杆菌标准身体接触用水和娱乐使用已经被大多数州成立。上限的每100毫升200粪大肠杆菌群,每100毫升2000总大肠杆菌群已经建立。这些值只

指南由于没有积极的流行病学证据表明,较高的沙滩浴场大肠杆菌计数与肠道疾病的传播。一些专家认为,这些标准可能过于保守的角度来看现实的公共卫生风险。近年来,没有直接联系例肠病在这个国家娱乐用水。大肠杆菌标准应用于水用于游泳是与水有关的皮肤和呼吸道疾病,而非肠道疾病。自然,这是完全不同于大肠杆菌饮用水标准的目的,这是与肠道疾病传播有关。更加严格的限制是必要的,因为一个配水系统有可能大规模传播的病原体燎原之势。

水样采集技术根据被测试的来源不同。采集水样本的最小数量的分销系统是每个月检查大肠杆菌群是一个函数的人口。例如,1000年和100000年的人口所需的最小数量是2和100年,分别。确定符合饮用水标准的细菌学的要求,不得超过一定数量的积极的测试。10毫升标准部分检查时,在任何一个月不超过10%应该是积极的(也就是说,大肠杆菌密度的上限是平均每100毫升)。

大肠杆菌群被定义为所有有氧和兼性厌氧,nonsporeforming物种。革兰氏染色剂-棒发酵乳糖产生气体48 h内孵化(35°C)。最初的大肠菌分析是假定测试基于天然气生产乳糖。在该测试中,10毫升水样的部分转移到准备发酵管使用无菌吸量管。管包含乳糖或十二烷基胰蛋白示,肉汤,倒瓶。接种管放置在一个热风孵化器(35°C±0.5°C)。增长的生产气体(气体被泡沫倒瓶)的存在意味着积极的测试。也就是说,它表明,大肠杆菌细菌可能存在。消极的反应,没有增长或者增长没有气体,不包括大肠杆菌群。

这样的测试是用来证实或反驳大肠杆菌群的存在积极的测试。在正常,饮用水大肠杆菌测试,确认测试使用亮绿胆汁肉汤。有时候,你可能希望运行一个完整的测试。这涉及到转让从一个殖民地Endo(或EMB板)营养琼脂和乳糖肉汤。如果没有乳糖发酵产生的气体管,殖民地转移不含有大肠杆菌群和测试是负的。如果生成的气体,部分生长在营养琼脂涂抹到载玻片上,准备用革兰氏染色剂技术在显微镜下观察。如果细菌是短棒,没有孢子,Gramstain是负的,存在大肠菌群和测试完成。如果文化革兰染色阳性(紫色),完整的测试是负的。在检查表面水质、高温大肠杆菌测试是用于分离微生物的粪便和nonfecal大肠菌群

来源。这种方法适用于研究河流污染、冷水塔来源、污水处理系统、水洗澡,一般水质监测。不建议代替饮用水域的大肠杆菌测试用于检查。

水分析是不完整的,除非大肠杆菌细菌的数量决定。一个复合管发酵技术可用于枚举积极的假定,证实,粪大肠菌测试。测试结果表达的最可能的数量(或然数)。即计算是基于统计分析的集管的一系列连续稀释。或然数和100毫升的样品体积相关。因此,10意味着大肠菌的或然数每100毫升的水。

或然数确定、无菌吸量管校准在0.1毫升的增量。其它设备包括无菌包含有螺旋盖的稀释瓶99毫升的水和包含六套五架乳糖发酵肉汤管。无菌吸管用于转移1.0毫升的部分样本到每个5发酵管。这是紧随其后的是0.1毫升分发到第二组5人。为下一个更高的稀释(第三),只有0.01毫升的样品水是必需的。这个小吸管准确数量是非常困难的,所以1.0毫升的样品放置在一个包含99毫升无菌稀释瓶水和混合。1.0毫升含0.01毫升的部分地表水样品然后用移液器吸取为第三组五管。第四组收到同样的稀释0.1毫升瓶子。然后进行一个步骤过程从第一个稀释1.0毫升瓶转移到99毫升的水二倍稀释。从这部分稀释瓶用移液器吸取到第五和第六管集。 After incubation (48 h at 35'C), the tubes are examined for gas production and the number of positive reactions for each of the serial dilutions is recorded.

最后一个值得注意的测试技术是膜过滤方法对大肠杆菌测试。这个过程包括通过测量水样通过膜过滤去除细菌。然后过滤器放置在培养皿中生长介质。滤板生长的细菌保留并建立一个小殖民地。目前大肠杆菌群数计数的数量建立的殖民地和表达这个值的数量每100毫升的水。这种技术已经被广泛采用,用于水质监测研究,特别是因为它需要实验仪器装置大大低于标准的许多试管技术。同时,这种技术可以适应领域的研究。设备需要执行大肠杆菌测试包括滤膜过滤设备,过滤膜,吸水垫、钳、文化菜肴。普通实验室过滤装置由一个漏斗,系一个插座轴承支持过滤膜的多孔板。filterholding大会可以构造的玻璃、陶瓷或不锈钢。 It is sterilized by boiling, autoclaving, or ultraviolet radiation. For filtration, the assembly is mounted on a side-arm filtering flask which is evacuated to draw the sample through the filter. For field use, a small hand-sized plunger pump or syringe is used to draw a sample of water through the small assembly holding the filter membrane.

商业过滤膜通常是那直径磁盘毛孔开口为0.45 (±0.02)r .这是足够小,保留微生物细胞。过滤器用于确定细菌计数有网格表面印刷。促进菌落计数,使用前必须消毒过滤膜,在玻璃培养皿或裹着厚纸。灭菌后,垫被放置在培养皿中吸收的营养介质膜滤波器。在测试、过滤器处理的外边缘与钳也在使用前消毒。

使用玻璃或一次性塑料培养皿中。如果使用玻璃培养皿,潮湿的环境中必须维护在孵化。这可以防止损失的媒体通过蒸发(菜有宽松的封面)。一次性塑料餐具有紧身盖子,减少脱水的问题。过滤后的样本的大小是由预期的细菌密度。理想的数量导致大约50个大肠杆菌菌落的生长和不超过200年殖民地的类型。通常它可能很难预测样品中细菌的数量。两个或三个卷相同的样本都必须经过测试。当被过滤的部分小于20毫升,少量的无菌稀释水被添加到过滤前漏斗。这种均匀分散的细菌悬液在整个表面过滤器。 The filter-holding assembly is placed on a suction flask. A sterile filter is placed grid side up over the porous plate of the apparatus using sterile forceps. The funnel is then locked in place holding the膜。过滤通过执行局部真空下的样本通过过滤器。准备一个培养皿放置无菌吸水垫在盘子的上半部分和移液浓缩媒体饱和搁在本子上。M-Endo介质用于大肠菌群和粪大肠杆菌群M-FC。然后删除过滤器的过滤装置和直接放置在垫在盘子里。封面所取代,文化是孵化(为24小时35°C)。粪大肠杆菌群,孵化是由将文化菜防水塑料袋和淹没在水浴44.5°C .大肠杆菌密度计算的大肠杆菌群由殖民地数乘以每100毫升100毫升的这个值除以样本过滤。

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